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雙熒光素酶報告基因檢測

雙熒光素酶報告基因檢測

產(chǎn)品型號:

所屬分類:分子生物學實驗

產(chǎn)品時間:2024-08-30

簡要描述:[雙熒光素酶報告基因檢測]慢病毒,腺病毒,RNAI類, 分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動物實驗,蛋白組學實驗,芯片類實驗,并為廣大客戶朋友們提供課題設(shè)計指導、基金申請指導、SCI. 核心期刊等服務。

詳細說明:

雙熒光素酶報告基因檢測

 

 

實驗意義

 

1.可廣泛引用與miRNA的靶基因檢測,可以判斷miRNA是否與靶基因結(jié)合,也可以定量反映miRNA對目的基因的抑制作用。

 

2.轉(zhuǎn)錄因子(反式作用因子)存在DNA結(jié)合域,可以與靶標啟動子中的特異序列(順式作用元件)進行共價結(jié)合,從而調(diào)控基因的表達,雙熒光素酶報告系統(tǒng)是檢測這類轉(zhuǎn)錄因子與基因特異序列的重要手段,是真核基因表達調(diào)控研究的常用方法。

 

實驗原理及流程

雙熒光素酶是指螢火熒光素酶和海腎熒光素酶,螢火蟲熒光素酶呈黃綠色,波長550-570nm, 海腎熒光素酶呈藍色,波長為480nm。報告基因?qū)嶒炇菍袠藛幼拥奶囟ㄆ尾迦霟晒馑孛副磉_序列的前方,構(gòu)建帶有靶標啟動子片段的雙報道基因質(zhì)粒,然后將待測的轉(zhuǎn)錄因子表達質(zhì)粒與報告基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293細胞或者其他相關(guān)細胞系,如果轉(zhuǎn)錄因子能夠激活

啟動子,則報告基因表達,熒光素酶的表達量與轉(zhuǎn)錄因子作用強度成正比。加入熒光素酶底物即可根據(jù)熒光強度檢測轉(zhuǎn)錄因子與靶啟動子之間是否存在相互作用。熒光素酶報告基因可構(gòu)建在同一質(zhì)?;蛘邩?gòu)建為兩個質(zhì)粒,即轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒與靶啟動子片段質(zhì)粒。

 

實驗完成周期及交付標準

實驗周期: 4-6周

交付標準:雙熒光素酶報告基因檢測、鑒定結(jié)果報告、分析報告、實驗報告(試劑、 耗材.實驗步驟)、原始數(shù)據(jù)等

 

需確認的信息

1.基因與啟動子信息

2.具體分許信息.

3.是否提供質(zhì)粒?

 

參考文獻

[1] Miraglia E , Nylen, Frank, Johansson K,et al. Entinostat up-regulates the CAMP gene encoding LL-37 via activationof STAT3 and HIF-1a transcription factors[J]. Scientific Reports, 2016, 6:33274.

[2] Azimzadeh P,Olson J A,Balenga N . Reporter gene assays for investigating GPCR signaling.[J]. Methods Cell Biol,2017:89-99.

 

收費標準/服務周期/提供結(jié)果:

歡迎咨詢詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議。

更多實驗技術(shù)服務請瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來電詳詢!

 

 

實驗代做服務:

ELISA試劑盒免費代檢測

CCK8檢測

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動物模型服務

流式細胞檢測

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實驗

細胞劃痕

鈣離子濃度檢測

掃描電鏡實驗

microRNA測序

動物實驗

探針合成

ATP/ADP檢測

石蠟/冰凍切片

定點突變

線粒體膜電位(MMP)檢測

細胞生長曲線的測定

藥理毒理動物實驗

 

免疫共沉淀

真核表達載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標定量(Label-free)實驗



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